A. 请问细胞病理学的地位和应用
一、细胞病理学涵义
人们常常认为细胞病理学就是查癌细胞。对，但不完整。Cytology、Cyto意为细胞，logy意为学问，Cyto与logy连起来则表示研究细胞的学问，即细胞学。
细胞学的本来意义包括范围很广大，不仅是细胞诊断学，也包括细胞生物学等。人们常常将细胞诊断学、临床细胞学或细胞病理学简称为细胞学。
这门科学属于诊断病理学范畴，当今最为提倡称为细胞病理学(Cytopathology)。
细胞病理学是以组织学为基础，研究组织碎片、细胞群团、单个细胞的形态和结构、以及细胞间比邻关系并探讨组织来源的一门科学。
细胞病理学包括两大部分，脱落细胞学(Exfoliative Cytology)和针吸细胞学或称小针穿细胞学(Fine Needle Aspiration Cytology or Fine Needle Aspiration Biopsy ，缩写 FNAC)。所谓小针是指穿刺针头外径小于1mm(瑞典)或小于0.9mm(中国)，国内一般采用7号(外径等于0.7mm)针头进行针吸或穿刺，其针头长度不限，依据需要选择长短。
二、细胞病理学检查程序
肿瘤医院和大多数综合医院都设有细胞学室。一般在病理科里设有细胞学室。有些医院细胞学为独立科室。个别医院在检验科，在国内不少妇产科中设置妇科细胞室。
当临床医师开出细胞学检查送检单后，有些细胞检查直接到细胞室去做。例如：体表肿物针吸细胞学检查，由细胞学医师操作取材。有些检查则由临床医师取材，例如抽取胸水、腹水、宫涂片和内脏肿瘤穿刺。有些检查去找影像诊断科医师取材，例如：胸腔和腹腔肿物等在超声、CT引导下取材。有些检查由患者自己按医嘱要求收集标本。例如：尿液和痰液等。
检查的程序：是收集检查标本，然后进行制备涂片。将选择适合检查质量的标本涂抹到借助显微镜检查的玻片上。为了保存细胞结构清晰，还需用固定液固定15分钟以上。同时为了认清细胞的形态特征尚需给细胞加上颜色，也就是染色。染色的方法很多，常规染色有巴氏和苏木素-伊红法，有时依据需要还要进行特殊染色帮助诊断。染色完毕用特殊透明胶将特制显微镜检查的盖玻片封上。最后才能在光学显微镜下，逐个视野寻找细胞，仔细分析这些细胞对诊断的意义，进行初步诊断。在中国医学科学院肿瘤医院细胞室，每天早晨工作人员集体用多头显微镜阅读有关病例，观察和讨论后再由负责医师发出诊断报告。
细胞学的送检单还要保留，并将诊断结果记录于登记本中。每例玻片还要存档保存，诊断为癌和有问题病例的玻片长期保留。没有癌细胞的涂片需存储两年后处理。
多年积累的最佳常规检查的流程，需要一定时间才能作出最佳诊断，一般48小时发出诊断报告。
三、细胞病理学在肿瘤诊断中的作用
1．进行人群或癌症高发区的普查 一般为定期有的放矢地检查某种癌症，可发现病人自己感觉不到症状的癌瘤，包括不少早期的恶性肿瘤，为早期治疗争取时间，大大改善病人的预后。例如：坚持多年的防癌普查使全世界宫颈癌的死亡率和晚期癌的发生率普遍下降。北京等10个省市地区612407例宫颈癌普查，发现早期浸润癌和原位癌占癌检出的61.02%。1974年河南林县姚村14002人食管拉网细胞发现癌221例，其中早期癌占78.6%；1975年林县城关食管拉网10330人找出癌237例，早期癌达83.6%。
2．诊断癌瘤，发现早期癌，为早期治疗提供依据 细胞学检查通过宫颈刮片、宫内膜吸片、食管拉网、尿、浆膜腔积液、溢乳涂片、痰涂片、内镜刷片、针吸内脏和体表肿块等途径的检查,诊断癌细胞或肉瘤细胞并能够进一步明确组织类型。因而是肿瘤诊断的重要方法之一。对较小肿物或体征不明显或病人感觉不到症状时，到医院体检细胞学检查也能发现早期癌。
3．癌瘤治疗后随诊 恶性肿瘤患者治疗后定期复查或确定是否复发。细胞学检查是最方便的方法之一。
4．认识癌前病变 细胞学诊断能够发现癌前病变，所谓癌前病变就是在一些致癌因素长期作用下，其发展为癌潜在危险的某些形态变化，经过治疗可以转归正常。因此，为癌症防治提供形态学依据,是营养干预试验和药物阻断治疗癌前病变转归的重要监测指标。
5．提示良性病变 针吸肿物亦能提示炎症感染，如淋巴结肿物针吸,依据一定形态特征提示化脓性炎症或结核性病变等。脱落细胞学检查也能够明确某些良性病变，如宫颈刮片发现线索细胞提示细菌性阴道病，发现核周空穴细胞则提示人乳头瘤病毒感染等。
四、细胞病理学的应用价值
1．无创伤性取材或微创性取材 取材途径简便快速，刮、涂、印、刷、抹、摩擦、离心集中和针吸、穿刺等，对病人损伤极小。以此奠定了细胞病理学应用的前景。
脱落细胞学主要利用病人分泌物和排泄物进行检查。如病人咯出的痰，乳头的分泌物，尿,胸、腹水等。
针吸或小针穿刺对体表和内脏肿物进行细胞学检查。小针的外径不超过1mm或不超过0.9mm。体表肿物操作方便,经皮取材；内脏肿物在模拟定位机、CT、超声检查等引导下经皮取材。理论上针吸可能引起针道种植，实际发生极少，有报道发生率0.005%。笔者尚未遇到。
针吸或小针穿刺对病人预后没有不良影响，小针穿刺是否安全，争论的焦点在乳腺肿物穿刺与否，实践证明如下述：
鲁宾(Robbing)等通过美国纽约纪念医院1576例乳癌根治术患者的追踪研究，认为针吸对乳癌5年存活率没有影响。
勃尔(Berg)等将患者按年龄、肿瘤组织型、组织分级、原发瘤大小和淋巴结转移五项指标分针吸组和非针吸组370对，连续观察15年，结果两组病人5年、10年和15年生存率相仿，无统计学差异。
阚秀等总结713例行根治术乳癌病人，分为针吸与非针吸两组，两组原发肿瘤大小，淋巴转移及病理类型几种较重要的影响预后因素基本一致。结果两组5年存活率分别为79.5%及72.7%；2年内死亡率分别为7.9%和10.8%，均无统计学差异。
当今在国际和国内广泛开展针吸细胞病理学检查，行之安全。
2．应用研究范围广泛 全身各系统器官几乎都能应用细胞学检查方法。鼻咽刮片、食管拉网、溢乳涂片、宫内膜吸片、宫颈和阴道刮片、痰检、尿检、内镜刷片等；以及甲状腺、纵隔和肺、胸膜、肝、胰腺、腹膜后肿物、前列腺、骨、皮肤和软组织肿物等，针吸均可用细胞病理学方法进行诊断。
3．诊断的敏感性和特异性尚满意 “敏感性和特异性”为评价细胞学诊断水平的指标。宫颈和食管细胞学检查敏感性和特异性较高，其在医院的敏感性80%～95%以上和特异性95%～100%。但1994年吉梅因(Gemain)等的报道宫颈敏感性63%～79%，宫颈特异性89%～94％；另外，作者报道食管敏感性47%，食管特异性81%。针吸细胞学各个器官组织肿物的敏感性和特异性不尽相同。一般敏感性在70%～90%或更高，特异性95%以上。涂片细胞形态结构清晰，核内微细结构清楚，对诊断起了不可忽视的作用。
4．难于获取组织病理诊断时，细胞病理学达到形态学诊断目的 如肺和纵隔或腹腔肿物不适宜手术的病例，经皮穿刺细胞学大部分能够明确肿物性质和基本的组织类型。给放疗或化疗提供形态学诊断依据。
5．细胞病理学可代替部分冷冻切片检查 如乳腺肿物针吸细胞学报告肯定是癌，术中一般不再做冷冻切片检查，缩短了手术时间。又如某些部位肿物，术中取活检困难时可针吸涂片诊断，确诊性质时直接手术切除。此时，细胞学专家掌握的诊断标准严格，若形态不十分肯定时，必须冷冻切片检查。
五、细胞病理学诊断的局限性
诊断时寻找组织碎片、细胞群、细胞团和单个细胞的形态结构，以及彼此关系作为依据。虽然细胞未经脱水、包埋、切片的处理，细胞结构清晰可辨。但是观察不到组织结构关系，至使在诊断上有时产生片面性和局限性。
1．原因
(1) 取材不满意则降低诊断的敏感性 如收集痰并非病人从肺深部咯出则不能找到癌细胞。食管拉网充气不足就摩擦不出癌细胞。晚期宫颈癌易出血可能涂片中仅见血细胞和坏死物则难明确诊断。针吸肺巨大肿物仅从一个部位吸出少许细胞成分，从而造成诊断的片面性。
(2) 肿瘤分化的影响 高分化肿瘤仅获取少许细胞成分，则诊断为不典型增生或不能作出诊断报告。低分化肿瘤容易明确恶性，如何鉴别组织类型非常困难。
(3) 有些细胞虽然是良性改变，但某些特征貌似恶性，所以给诊断带来麻烦。例如：不典型增生细胞、组织修复细胞和某些良性改变细胞的影响，致使造成假阳性诊断。不典型组织修复细胞，常常出现大核仁、多核仁、偶尔见到核分裂相，其与低分化癌或腺癌鉴别困难，单纯疱疹毒感染其细胞增大、多核和核内包涵体颇似癌细胞等。
(4) 肿瘤细胞退变的影响 恶性肿瘤生长迅速，往往发生变性和坏死。涂片中有时仅见坏死物、退变细胞碎片和退化性改变的细胞，结果不能明确诊断。
2．改善局限性的关键
(1)改良取材方法：改进涂片制备技术等，例如：目前国内正在逐渐推广的液基细胞学制片方法，使有效细胞成分尽量取到玻片上，并且细胞保存良好，结构清晰，给诊断带来方便。加强取材技术人员培训，尽量获取供诊断的足够细胞成分和清晰细胞结构。
(2)探讨光镜中与恶性细胞类似形态改变的特征，提高鉴别诊断能力。
(3)应用辅助诊断的各种新技术 电子显微镜、免疫细胞化学，细胞自动识别（影像分析系统和流术仪）和分子生物学、基因分子生物学技术等，应用于细胞病理学诊断的疑难病例。帮助光镜鉴别组织类型和探讨组织来源或纠正光镜错误诊断组织类型，或支持光镜诊断达到双确诊目的，或减少因视觉疲劳的漏诊率。
————————————————、
仅用肉眼观察器官病变仍然不能深刻认识疾病的本质，深入探索病灶内部微细结构的病理改变就成为当时病理学发展的必然趋势。显微镜的发明好像“雪中送炭”，使得困难重重的病理学迎来了一个新纪元。
在细胞病理学的建立过程中，德国病理学家微尔啸功名盖世，他一个人几乎垄断了细胞病理学早期的所有成就，他的《细胞病理学》一书为此学科奠定了坚实的基础，此书至今仍有可读性。
细胞病理学确认了疾病的微细物质基础，充实和发展了病理形态学，开辟了病理学发展的新阶段。这是人类医学史上的巨大进步。
B. 病理学在康复专业中的应用
其实病理学是学习医学的基础，懂得病理知识是深入了解医学问题的桥梁，但在实际的康复中不能体现，毕竟康复是技师类别的医学，以理疗等康复治疗为主，而病理学是理论知识。
C. 学习病理学的主要方法是
一． 空白到入门
第一步：病理技术、组织学、病理解剖学
方法：先实践后理论，再实践再理论反复循环。
先理论后实践，再理论再实践反复循环。
一般而言，前者的效果好于后者。就个人的经验而言，我学习多数其它的知识都是运用先理论，后实践方法。唯有病理我发现先理论后实践效果的不好。
进入病理科后，一般有三个月左右的时间学习病理技术。这三个月对你非常重要。你会遇到你以前从来没有接触过的仪器、名词、规范、试剂、工作流程等，当然还有各色各样的病理人。这时你要以最快的速度溶入病理科，病理科开展的项目、工作流程、科内的人员，各种仪器的名称及用途，显微镜的使用（学会用双目显微镜阅片可能需要半天时间甚至更长）等等。这些都需要在一周时间内了解。通过用心观察、向不同的人请教、看病理技术人员的操作，最好是在医、技师指导下亲自地去动手操作，这一周一般不难渡过。
三个月中余下的时间就要付出一点努力了，你要学会组织处理原理、病理常规切片、冰冻切片、免疫组化、特殊染色、病理档案的整理和归档、病理科的各项工作制度和操作常规、复习组织学、病理学教科书、掌握电脑的使用（包括电脑打字）等。
请有经验的老师订一个计划会是一个好的方法。但我们不可能要求每一个病理科主任都能给一个病理新兵制订一个科学合理的计划。没关系，以下是我们科里毕业生新入病理科前二个月的学习计划（附后），大家可以拿回去参考，再根据自身的特点加以修改。不同的医院不可能有完全相同的计划，自己也可以根据实际情况来调整计划，有了计划就要按照计划去实施，在实施过程中允许进行微调。
按计划实施的方法：
五多：多看，这里的看不是（watch而是observation），前者是不动脑子的随便看看，在看过以后不会有多少收获。而后者是用心地去观察；多动脑（如何？为什么？这样是不是行？）这些“？”要始终伴随着你，试着自己去消灭这些“？”，消灭一个问号就进了一步，你应该感到高兴；多提问，在病理科，对不懂或不明白的事要多问有经验的技师或医师，不提问有些问题你可能永远也不会明白，或者要花很多时间才能明白；多动手，亲自去设置一下脱水机的程序，再把它回复到以前的状态、亲自去切片、做冰冻、更换染色液、配制苏木素、在指导下做一次免疫组化、对着书配制特殊染色染液，并做出几种常用的特殊染色片等等。只有亲手操作过才会有深刻的体验。病理技术靠读书或者是看别人操作是学不会的。在学病理技术的时候一定要注意操作的规范，养成按规范操作的好习惯。你所在的病理科的操作可能并不规范（据我的了解，目前至少有一半的病理科的组织处理方法是不规范的，如省略组织水洗、用硬脂酸石蜡透明、用酸性福尔马林固定等），当然你学到的操作也是不规范的。你是新兵，你不知道也不可能去要求你们的主任改变目前的操作方法。但你应知道什么样的操作是规范的。如果真是这样，你也不用着急地“一步到位”，只要你是一个有心人，在以后的工作或学习中你会逐步了解什么是正确规范的操作；多读书，这期间所需读的书为病理技术书、《组织学》和《病理解剖学》。病理技术书不需要通读，应结合科室内开展的项目有目的地查阅，每当你学习了某种操作后，可以查阅书上的相关章节，以印证你所做的操作是否规范。组织学同样不需要通读，而应对照教学切片，识别和消化切片中各种器官组织的形态。病理解剖学是病理医生的必读书，要求通读。这本书主要利用业余时间来读，读这本书同样有技巧，有些年轻人可以把这本书背熟，但会背书的人不一定能在实际工作中灵活运用所背的理论。这本书的重点是绪论和总论，绪论部分介绍的病理学的定义、病理学的内容和和任务、病理学在医学中的地位、病理学的研究方法、病理学的历史等。总论部分介绍了细胞和组织的损伤、损伤的修复、炎症、肿瘤、血液循环障碍、免疫病理、遗传性疾病等，这一部分介绍了各种疾病（肿瘤）的普遍规律。各论部分讲述的是各系统器官的特殊规律，这些特殊规律也同样遵循普遍规律。学习时先掌握普遍的规律，再了解各系统的特殊规律，并从中强化总论的普遍规律。例如从总论中学到炎症主要有变质、渗出和增生三种变化，在各论中你可能会学到肺结核，那么回忆一下，结核是否也具备上述三种变化。在以后病理学的学习中如果能从普遍（一般）――特殊这样的方式来思考，你将会事半功倍。学习《病理解剖学》，每一种疾病或肿瘤，其形态特点当然重要，但在读这本书时应尽量谈化形态改变而应理解各种病变的概念、病因、发病机理、发生发展规律、预后及转归等。
第二步：巨检、取材
三个月结束了，终于接触到了病理诊断。第一关就是活检标本的固定、巨检和取材。固定、巨检描述和取材和同样需要规范。
固定液一般采用10%的中性福尔马林，固定液与标本体积之比1：5－10，固定时间16－24小时。胃肠等空腔脏器剪开后钉在木板上，较大的实质性肿瘤和脏器沿最大面剖开，每隔1CM作多个平等切面，脾、肾等实质性脏器从皮质向脏器门部剖开，然后浸入固定液，肺用灌注法或真空抽气法固定。
巨检描述要求正确、全面、客观、测量正确、必要时对肿瘤称重（如内分泌肿瘤）、禁用诊断性语言，最好摄影留档，一千字的描述不如一张照片（广告语）。
巨检描述方法与技巧：
1、 描述内容和技巧：①标本名称。②形态、大小（重量）、数量、手感。③表面情况（颜色、包膜、是否光整等）。④切面情况（形态、颜色、境界、质地，空腔脏器和囊性肿块描写内表面情况）。⑤病变与周围正常组织的关系。⑥病变的解剖定位。⑦对病变部位及取材部位应画图并标记。
2、 描述的顺序：①先表面后切面，先浆膜后粘膜。②有几个脏器时应先描写一个脏器，再描写另一个脏器。③有几块组织或肿块时分别描述。
取材：不同脏器、不同标本和不同的病变组织有不同的取材规范。取材宁多勿少，必要时作补充取材。不同标本的取材规范见《阿克曼外科病量学》书后的附件。
第三步：常见病的病理诊断：
这个过程相对简单，主要以大量阅片来主，配上一本简单的外科病理学参考书查阅相关内容，不需要去“啃”大部头书。最常用的方法是把本院以前发过报告的档案片和申请单调出来阅片。一台显微镜、一抽屉的档案片、一叠申请单、一本书、一本笔记本，有这几样东西就够了。白天要干活，可能没有时间，那就晚上把。一例一例地看过去，先看片，再猜是什么病，再看申请单底稿上的诊断，对了，PASS；如果不对，自问一下为什么？再去查书，查书后懂了，又可以PASS；不懂，记下来，明天请教你的上级医师。这一阶段主要培养对形态的感知能力，在查书过程中也主要着重于大体和镜下形态的改变。同时，在读申请单底稿时你也同时强化和掌握了巨检描述、镜下形态描述和病理报告的格式和规范。更多的理论知识可以放到下一步去学习，如果你刻苦一点，也就需要2－3个月的时间，80%以上的常见病的形态特点和报告格式你就可以掌握了，如阑尾炎、胆囊炎、胃癌、乳腺癌等等都是最常见的疾病和肿瘤。
这一阶段过后，你的日常工作就会轻松一点，因为你已经掌握了80%以上的常见病，上级知师复阅你的诊断也很轻松，每天遇到的不会诊断的病只是少数，这少数中一部分还可能是灰色病变（灰色病变的诊断下面会专门讲），那么，实际上你每天要学习的以前未见过的病例可能只有几例，你可以利用上班的时间争取当天解决问题。
三个月的技术组，三个月的常见病学习结束了。如此，半年过去了，病理入门了吗？没有，还需努力。常见病，典型的病容易掌握，因为太多见了，几乎天天见到，不会忘记。但相对少见的疾病和肿瘤可能几个月甚至几年才有一例，即使这次理解了，几个月以后又遇到同样的疾病或肿瘤时，你又忘记了。另外，你会诊断发报告，并不能说明你已掌握了病理，因为病理的任务不仅仅是诊断，你还需要掌握疾病的病因、发病机理、发生发展的规律、预后、疾病的转归、免疫组化的表达情况和目前主要的治疗手段和治疗效果。病理医生，是一个医生，而不是只会从形态到诊断的看片匠。实际上，在工作中经常会有临床医生或病人来问类似病因、预后、治疗……等上述提及的问题。你不知道，你如何面对临床医生和病人？在以后的工作中，在掌握常见病形态改变的基础上，着重点应放在常见病的理论学习上。病理形态的改变只是一个表象，为什么这种病会有这样的形态改变？疾病发生发展不同时期为什么会有不同的形态改变？一般而言，都有其病因学、病理生理等的基础和机理，了解了这些机理，就能更快地理解和记忆形态的改变。在此期间还应不断地积累少见病的知识。一年以后，如果你努力，你就可以入门了。
二． 入门到深入
第一步：掌握少见病例，疑难病例的病理诊断
因为少，平时工作中不容易见到，要掌握少见疑难病例的诊断相对困难，以下是几种常用的技巧。
1． 遇到一例，吃透一例，记录一例，绝不放过（因为那是金子啊）。就此还不够，还应掌握相关疾病和易混淆疾病的鉴别诊断，最好在查阅相关书籍和文献的基础上写一篇读书笔记或个案报导。这时候，你遇到的少见病或疑难病并非是真真意义上的少见或疑难病，写个案报导不一定能发表，这并不重要，重要的是通过“写”的过程，你能完全地掌握该病例的临床病理知识。这就是“写”的目的。
2． 阅读科内教学切片。如果科内有教学切片，先读完并掌握教学切片的病例。
3． 大量阅读读片会的切片。由浅入深地阅读档案读片会切片。有一点历史的医院都积累有大量的各级病理读片会切片材料，一般都有最终的诊断结果。这些档案对新兵是非常宝贵的财富，一开始可以读市级或地区级的读片会切片，这些切片难度较小，以后可根据自身的情况阅读省级的读片会切片。经过大量读片会切片的训练，知识面将大大扩展。业务能力也可明显提高，特别是在工作中遇到了读片会切片中已阅读过的病例，而又对此作出了正确的诊断，你就会产生一种成就感。如果真有过这种“成就感”的经历。恭喜你，你已经对病理产生了兴趣，这是你事业成功的第一步，也是最关键的一步。
4． 不要放过每天的每一张切片。如果你在大一点的医院工作，恭喜你! 大医院往往会有多名医生，你不可能每天都当班，但无论你是否当班，都应把当天的切片全部“扫”一遍，已掌握的快速PASS，未见过的弄个水落石出。
5． 上网。不多说了，上中国病理学网就不错。不用怕，有什么问题就提，有什么病例就贴。这里的老师都是好人。
如此，又是一年过去了，或许需要二年或更多的时间，你已是一个理论诊断均不错的病理医生了。
第二步：进修
又是事业成功与否的关键，进修一般都会选择省级的大医院，那里不但有很多的病例，也有理论水平很好的老师。一般而言，教学片是很多的，会有定期或不定期的分系统病理讲座，免疫组化、分子病理、电镜等先进的病理技术都会用于病理诊断，制片操作和报告都比较规范，还有成人尸检。那就好好学吧！进修的一年，对多数病理医生来说，一生也只有一次进修的机会，好好把握吧。
进修的技巧：
1、“搞定老师”。这是进修效果好坏的关键。不但要“搞定老师”，还要与病理科的其它人员（包括技师和其它进修人员）搞好关系。如何“搞定老师”不同的老师有不同的方法，这是一个公共关系学的课题。以下是几条原则①不要只干病理，更要干卫生，干杂活。②老师交办的事一定要在规定时间内保质保量地完成。③取材要规范和到位，尽可能地减少补充取材；描述、报告要规范，减少老师修改的工作量。④工作要注重效率和速度。⑤在工作前做好充分的准备。⑥在上级医师复片前做好充分的准备，如补充病史，开出免疫组化单等。⑦注意个人仪表。⑧其它（因人而异）。
2、 每天的切片过目一遍。不管是否是你班上的切片，也不管是常规切片，还是冰冻切片，免疫组化片，阳性的细胞学片等，如果有时间，会诊片也不要放过。这些都建议在当天消化吸收，不能理解的病例记录下来找机会请教老师。这里的老师往往理论水平比较高，他们讲一个病可能只有几分钟，但效果很好，容易记忆。
3、 讲课时做好笔记。主要记录了各种疾病（肿瘤）的要点，还有老师本人的经验，有时复习笔记比查书更有效。
4、 对教学切片“大扫除”。最初进修的1－2个月，对进修医院的教学切片通读一遍，方法同前。
5、 学习正确的技术操作和诊断规范。把上级医院良好的操作和诊断规范记录下来，带回到你的医院。这是一笔宝贵的财富。
6、 拾遗补缺，档案大搜索。在进修后期，你的水平将会有明显提高，书本上的大部分肿瘤（或疾病）可能你都遇到过了，但总还有一部分你没见过的肿瘤（或疾病）。拿一本《外科病理学》，从第一页一直翻到最后一页，把没见过的肿瘤（或疾病）都记录下来，然后到电脑上去搜这些病例，搜到后调出切片慢慢消化。
7、 学习处理灰色病变和可能引发纠纷病例的技巧。注意二个方面，一为冰冻切片诊断中度的掌握，掌握什么时候应该延迟诊断；二为灰色病变的处理。
第三步：从大病理到专科病理
如果一切顺利，可能也就是5年多的时间吧。当你已基本掌握了大病理以后，可以进入专科病理的深入学习。选择一个你们医院的临床强项专科，深入学习，不断地积累经验，不断地总结。专科病理的深入是没有止境的，需要掌握的内容至少有，该系统肿瘤的各种分类，各种特殊类型、亚型的临床病理理论（很多的内容），历史上对它们的认识过程，当前国内国际的最新研究进展，以及你个人对于专科病理范围内的独到的见解等。学好专科病理三要点：首先需要积累大量的病例，其次需要阅读大量的文献，第三要做大量的研究。
三． 从深入到专家
因为我不是专家，无法谈这方面的体会。很想成为专家，但也许终我一生也成不了专家。这个问题最好请JI来作一次专题讲座。如果可能，我想以下几条将有助于你成为专家：
1、 利用一切机会接触疑难罕见病例
2、 利用一切手段搜索深入的理论
3、 利用一切病理技术进行研究
4、 其它……
临床病理学习工作中的几点技巧：
1、 记忆临床病理要点：每一种疾病都有一系列的临床病理改变，其中有些是非特异性的，而有些是特有的。那么记住后者吧。例如，软组织梭形细胞肿瘤，梭形细胞是非特异性的形态，而波浪状纤细的梭形细胞是神经来源肿瘤特点，而栅栏状排列和有完整包膜又是神经鞘瘤的特点。梭形细胞加大量的胶原化浸润性生长和发生于腹壁这是韧带样瘤的特点。在诊断是否是淋巴瘤时，是否有淋巴结结构的破坏是特点，而淋巴细胞是否有异型往往会让人误入歧途。在区别是T细胞淋巴瘤还是B细胞淋巴瘤时，是否有血管（上皮样小静脉）的增生往往比区分细胞形态更容易。在诊断高分化软骨肉瘤时临床的发生部位和肿瘤大小比单纯从细胞异型性上判断更为准确。
2、 纵横交错，织成知识网络：知识形成了网络就不容易遗忘，所谓的举一反三就是织网的方法。如甲状腺癌的诊断不能以肿瘤细胞异型性的大小来判断，而应找到包膜、血管的浸润或远处转移为依据。在肾上腺等其它内分泌肿瘤，这个原则同样适用。唾液腺的腺样囊性癌有特殊的形态特点，在肺内、乳腺内、胆囊内也可以发生腺样囊性癌。
3、 通过胚胎发生学帮助记忆：大部分肿瘤都有一定的好发部位，而要记住这些好发部位很困难，如果能够理解其胚胎发生，机械机忆就变成了理解记忆。如脊索瘤好发于斜坡（40%）和骶骨（45%），其它都沿着脊椎生长……。如果你了解了胚胎的脊索结构位于中线。再也不用死记以上的一套发生部位了。又如脂肪肉瘤的形态多变，有很多亚型，还有各种脂形态的脂母细胞……记忆这些形态改变也很费劲。如果了解成熟的脂肪组织是从原始的间叶组织发生的过程及各阶段的形态，记忆这些形态改变就很容易了。
4、 灰色病变的学习和处理：灰色病变很多，灰色病变不仅是指界于良恶性之间的那一类病变，还有很多良性的灰色病变。如形态不典型的结核，结核的误诊将导致不必要的抗结核治疗。同样，是否是子宫内膜增生也是灰色病变，因为这可能引起不必要的内分泌治疗，甚至子宫切除。还有，是否是HPV感染的诊断可能给病人带上性病的“帽子”。学习灰色病变没有什么巧门，也没有什么理论（如果真有理论也就是书上写的那一通形态描述）。掌握灰色病变只有多看多练，培养一种对灰色病变形态的感知力。当你还是一个新手，又不得不面对灰色病变时，处理这类病变的技巧就变得很重要，一是建议临床再次取材活检，二是拿出去会诊，三是用疑为…、见少量异型细胞…、不除外… 、考虑为…可能性大这样的描述性述语。有一位资深的病理医生曾说过“宁可让临床医生说我们笨，也不要往前冲。”
5、 “地雷”的排除：病理工作中有一些公认的“雷区”，事实上很多病理医生都有过“触雷”的经历。找到“雷区”是排除“地雷”的前提，只要能识别出“地雷”，排除就不是难题。常见的“地雷”有：骨肉瘤与骨痂；结节性筯膜炎与肉瘤；高分化软骨肉瘤与软骨瘤；乳腺小管癌与乳腺腺病；脂肪瘤与脂肪瘤样脂肪肉瘤；传染性单核细胞增多症与淋巴瘤等
6、 减少冰冻风险的技巧：补充病史、多部位取材、做快速石蜡切片、了解作出诊断后临床是否会扩大切除范围、与临床医生一起面对面地与家属沟通谈话、最终延迟诊断。以上都是减少病理医生风险的常用手段。延迟诊断过多往往会引起临床医生的不满，对于冰冻延迟诊断的病例，我们往往常规也“延迟”（与临床医生说要做免疫组化，或者建议上级医院会诊），这样可证明这确实是个疑难病例，因为常规也不能明确诊断，冰冻当然要延迟诊断了。
7、 整理好思路：遇到疑难病例，诊断的思路很重要，思路正确往往导致正确的诊断。正确的思路又往往不是第一感，怎么办？那就用缓兵之计吧。我经常会遇到这样的情况，下级医师拿过来一张切片，在镜下一看，唔！好像不太好吗？没好的思路，又不好意思当着下级医师的面查书（丢不起那个脸啊：））。让他们先去：再取几块看看、或者去问一下有…病史、要不然考虑…建议做免疫组化…先这样把报告发了…。回到家里，再慢慢思考，翻翻书或查查文献。有了思路，有了诊断，第二天就可以对他们1234一大套理论。
8、 病理与概率：好发年龄、好发部位、发病率等这些都是概率。常见病、好发部位、好发年龄总是多数，你不可能总是有“好运气”，概率对每个人都是公平的。因此，当你诊断一个不常见的病或者一个不是好发部位或好发年龄的病时，请一定小心了。只有确定排除了那些常见的疾病或肿瘤以后而又有明确的诊断依据时才以作出罕见病的诊断。还是那句话“你不可能总有好运气”。掌握概率，可以减少大部分的误诊。病理中“一元论”，和“二元论”的问题也是一个概率问题。没有把握的情况下总是用一元论来解释病变，而“二元论”的病例往往是很少的。
9、 免疫组化的合理应用：免疫组化不是万能的，没有免疫组化是万万不能的。一位著名的病理学家曾说过以下几句话：
没有任何生物标志物对所有肿瘤和细胞都完全适用。
没有任何因定液对所有抗体都适合。
切片内所有组织都阳性实际无阳性。
免疫组化不能比使用者对它的认识更高明。
选择合适的抗体、严格规范的操作、对免疫组化结果的正确理解和解释、同类抗体的联合应用是免疫组化技术运用成功与否的关键。
10、 补充取材，连续切片，补充病史：充分利用这些简单的手段吧，可以减少相当一部分的会诊。
11、 会诊尺度的把握：会诊是不可避免的，但不可过多，动不动发“建议上级医院会诊”这样的报告，会让临床和院长看低了你。但也不要逞强，毕竟安全第一，这个度只有自己掌握了。
12、 细胞学的学习，找干细胞老师吧
13、 上网吧，中国病理学网是一所非常好的学校。
14、 积极参加读片会，并积极参与讨论。
附：我科病理医生技术组培训计划（二月）
1． 组织学，常规切片：三周。要求用兔子制作一套组织学教学片，包括2－3种特殊当染色。制作显微摄影。
2． 记录、登记、病理档案，一周：掌握大体记录，病例登记，病理各种档案的归档。
3． 冰冻切片、大体摄影一周：掌握冰冻制片及大体摄影技术。
4． 细胞学：一周。掌握各种细胞学制片及染色方法。
5． 免疫组化：一周。了解免疫组化原理、在临床病理学上的应用，了解免疫组化的操作技巧，制作一次免疫组化片。
6． 特殊染色：一周。了解特殊染色的原理及其在病理学中的应用，掌握2－3种特殊染色方法。要求自已配制特殊染色液，自己制片。
7． 学习《病理解剖学》及《组织学》本科教材。镜下能识别各脏器正常组织结构及细胞形态。
8． 熟练掌握电脑打字技巧。
9． 了解病理科各项制度及操作规程。
D. 请问分子病理学的地位和应用
地位：分子生物学的发展, 是人们对肿瘤细胞增殖生长和转移过程中的信号转导通路作用机制研究的不断深入，继而为其特异性靶点而设计的分子靶向药物的开发,使肿瘤治疗已经进入了一个全新的时代。同时也为病理学提出了新的挑战，并注入了新的活力。病理学不再局限于组织和细胞水平的诊断，而开拓了分子病理学的新领域：不仅为寻找新的分子靶点提供线索，还可以通过基因检测为分子靶向治疗提供依据，从而使靶向治疗做到更有的放矢。目前有应用前景的靶点包括蛋白激酶、肿瘤血管生成、细胞周期调控等方面，这其中尤以针对突变激酶靶点的治疗取得的进展喜人。
分子病理学的应用
一、伊马替尼治疗胃肠道间质瘤（Gastrointestinal Stromal Tumors GIST）与c-kit、PDGFRA基因检测
Imatinib mesylate（伊马替尼，过去称STI157，商品名Glivec 或Gleevec）治疗GIST是近年来一个成功的分子靶向治疗模型，而有关GIST以基因型为基础的治疗还有许多问题有待解决。深入研究GIST的分子病理机制可以为完善其分子靶向治疗方案提供实验依据，并为其它肿瘤特异靶点的发现提供线索。
1.伊马替尼用于治疗GIST的分子基础
2001年伊马替尼的出现标志着针对肿瘤细胞信号转导通路的抗肿瘤战略取得了令人瞩目的突破。伊马替尼是一种酪氨酸蛋白激酶抑制剂，是第一个基于对肿瘤细胞信号转导机制的认识而开发的抗癌药物，在原癌基因性的酪氨酸激酶和伊马替尼之间的基因型与药物的反应关系对于研发其它肿瘤的靶向信号转导抑制剂提供了一个有意义的模型[1]。最初伊马替尼的研发是作为血小板衍生生长因子受体 (PDGFR)的特异性抑制剂，而后发现其能选择性地抑制Bcr-Abl蛋白激酶从而抑制白血病细胞的生长及肿瘤的形成，且不影响对正常细胞生长和增殖起作用的激酶，对治疗Bcr-Abl 阳性的慢性粒细胞性白血病有较好疗效。Buchnger等人后来发现伊马替尼还能阻断酪氨酸蛋白激酶受体KIT的功能，使人们把它与GIST联系起来。GIST对传统的化疗和放疗无效，临床试验证实伊马替尼对难切性和/或转移性GIST非常有效，目前已经用于晚期不能切除的GIST，而且开始应用于术后的高复发危险的患者的辅助治疗。我国自2001年亦开始应用伊马替尼治疗GIST，并获得相当效果。
GIST是胃肠道最常见的间叶性肿瘤，每年发生在美国至少为2000～5000例，在中国，发生率也有逐年上升的趋势。GIST可发生于胃肠道的任何部位，以胃和小肠最为多见，少部分发生于网膜、腹腔等。近年研究发现GIST与胃肠的间质Cajal细胞 (ICC) 在形态和免疫表型以及超微结构上具有相似性，都具有表达KIT蛋白的特征，提示GIST可能起源于向ICC分化的干细胞。由于目前普遍认为GIST没有绝对的良性，尚未发现可以特异性预测恶性转变的指标。依据Fletcher 2000年提出的GIST生物学行为分级标准可分为极低度、低度、中度和高度侵袭危险性，最终恶性的判断取决于肿瘤的复发或转移。这就为从分子病理学角度上重新认识GIST提出了迫切的任务。
由原癌基因c-kit编码的KIT蛋白属于III型酪氨酸蛋白激酶跨膜受体（RTK），由胞内的酪氨酸激酶区、跨膜区和带有配体结合位点的胞外区构成。在与其配体干细胞因子（SCF）结合后发生二聚体化，激活自身酪氨酸蛋白激酶活性，使受体残基发生磷酸化，引起胞浆内具有SH2功能域的信号转导蛋白与受体结合，进而激活下游的信号传导通路，如Ras/Raf/MEK/MAPK通路，PLC/DAG/IP3通路，PI-3K/AKT通路，JAK/STAT通路等，引起一系列的细胞变化，在包括增殖、粘附、凋亡和分化的肿瘤发生过程中调控细胞功能[2]。因此KIT原癌蛋白的表达是GIST发生的核心事件，也是目前普遍认可的确定GIST的特异敏感标准 (CD117阳性)。阐明KIT信号通路对临床同样具有重要意义。因为GIST病人可能最终对KIT抑制疗法耐药，因此人们正在努力研究发现下游信号中重要的蛋白分子以作为对KIT抑制疗法耐药的新靶点。
2．c-kit基因检测对伊马替尼治疗GIST的意义
1998年报道GIST中存在c-kit的基因突变，使其在无配体结合的情况下，KIT蛋白仍然能保持持续的自身酪氨酸蛋白激酶活性，从而激活下游的信号转导通路。目前认为kit的这种获得功能性的突变是GIST发生的重要机制。其中在kit基因编码近跨膜结构域的11号外显子中的突变最为常见，占50%～92%，此外在胞外结构域的9号外显子、激酶结构域的13号外显子和磷酸转移酶结构域的17号外显子的突变分别占8～13%、0～4%和0～4%。其中11号外显子的突变形式多样，包括框内缺失突变、点突变和框内串联重复（Identical Tandem Duplication ITD）插入突变。国内有关GIST分子检测的报道还很少，多集中在11号外显子突变，且样本量较小，突变率低，为30.8%（14/52）和41.5％（34/82），而未见9、13、17号外显子突变的报道。我们的60例GIST小样本研究显示其中38例（63.3％）检测到kit突变，均为CD117阳性：其中35例（58.3％）为11号外显子突变，2例（3.3％）为9号外显子突变，仅1例（1.7％）13号外显子突变，未检测到17号外显子的突变[3]。进一步扩大样本100例GIST中68％检测到kit突变(未发表)。似乎9号外显子在我国GIST的突变率明显低于国外，因为有研究指出9号外显子属于较特殊的一种突变亚型，往往发生在胃外，生物学行为属高度侵袭危险性。我国的这种（原诊断为恶性）GIST比例明显高于国外，且发生在胃外的并不少见，国人GIST是否有不同的基因突变位点谱，需要进行大样本研究。近来不少研究试图将突变比例与组织学特征和临床行为相联系，早期有一些报道进展期或高度侵袭危险性的GIST中突变多见，但目前多数报道提示基因突变情况与进展性行为有关的肿瘤大小、分裂相或分期等因素之间无明显相关性。国内相关文献均为高度侵袭危险性者突变常见，而我们的初步结果显示即使是因其它疾病偶然发现的直径小于1厘米的GIST中也有相当比例携带11号外显子突变，同Antonescu CR的结果一致。因此需要大样本进行统计分析，找寻我国GIST基因型与病理、临床特点间的规律，并进一步明确kit突变在GIST发生中的作用。
kit突变本身是否与病人的预后相关，目前尚无定论。有研究表明kit突变是一个生存的独立预后指标，即有突变者的5年生存率要低于无突变者。且有研究指出具11号外显子的点突变者较缺失和插入突变者生存率高。
伊马替尼的应用可明显改善病人的预后。已有资料证实kit突变的位置能影响GIST对伊马替尼的反应。一些体外和临床研究已表明突变在激酶位点的病例对抑制剂并不有效，如与肥大细胞增生症相关的激酶区D816V突变。幸好大多数kit突变都位于调控区即非酪氨酸激酶结构域，这就使抑制剂能有效地封闭酶位点。并且11号外显子有突变者与没有突变者和9号外显子突变者相比，对伊马替尼的部分缓解率（partial response rate）明显提高，平均生存期延长，病情进展缓慢[4～5]。
同时亦有研究提示伊马替尼可以通过促进NK细胞活性等其他途径来起到和增强其抗肿瘤作用。即使是KIT低表达的GIST, 伊马替尼亦具有一定的治疗作用。
因此检测病人手术标本中c-kit基因突变的情况对判断伊马替尼应用的预后有重要意义。
3．PDGFRA基因检测与GIST
对于缺乏 kit 突变的GIST的发生，近年来日益受到研究者的关注。由于发现即使是在包含野生型 kit 的GIST中KIT 也活化，就把人们的目光引向KIT 相关的受体酪氨酸激酶（RTK）。这一类RTK包括前原癌基因FMS，其编码巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF1) 的受体；两个PDGFR基因：包括PDGFRA和PDGFRB；FLT1与FMS相关的一个前原癌基因。其中PDGFRA 基因和 kit 基因位于人4号染色体的相邻位置上，两者的氨基酸序列有很高的同源性。近来国外报道在28%～67% 无kit突变的GIST中检出了 PDGFRA 的突变，并且 PDGFRA 突变与 kit 突变是相互独立的。因此目前认为获得功能性的 PDGFRA 突变很可能是 GIST 的另一个病因。一方面PDGFRA的信号转导通路与kit 相似，功能性的 PDGFRA 突变可以转化小肠的 Cajal 细胞；另一方面PDGFRA的功能性突变在293T 细胞中能与野生型的 kit 结合并使之活化。这一发现进一步证实了III型RTK的激活在促进GIST发生中的核心作用。国内尚无有关PDGFRA突变的报道。我们在60例中的3例检出了PDGFRA突变（5％），占无KIT表达病例的50％，全部为 18号外显子（活化环结构域）的点突变D842V，为最常见的突变形式。未检测到12号外显子（近膜结构域）的突变。与Medeiros等人的报道相似，此类突变多见于发生在网膜/肠系膜的恶性病例。而最近Lasota J的较大量病例研究表明PDGFRA突变主要发生在胃部，且大多生物学行为呈“良性”经过[6]。因此我国PDGFRA突变的突变情况还需扩大病例数进行研究。
目前证实PDGFRA 18号外显子突变对抑制剂疗效不明显，但仍有30％PDGFRA 突变的病例对伊马替尼敏感的报道提示我们应重视KIT阴性GIST的诊断问题以及应进行相应基因突变检测判断能否适用于伊马替尼治疗。
由此是否可能将GIST按照分子水平上的改变分成至少三种类型，即kit 突变型、PDGFRA突变型和无突变型。因此GIST可以看作是在大多数情况下由单独的分子机制所驱动的肿瘤。而绝大多数人类的癌发病机制复杂，如能按照具有明确的分子改变分类，就有可能针对每一类型实施以特定分子为基础的治疗。由于绝大多数GIST有KIT的高表达，即使是在不具有基因突变的病例中，因此这部分GIST的发生源于何种启动因素，目前尚无相关研究。Kit突变是GIST发生的早期事件，且具有突变的“良性”GIST 大多数并不进展为“恶性”，这表明kit突变本身并不能引起GIST的恶性转化。而导致GIST恶性转化的因素目前还未知。
4．c-kit基因、PDGFRA基因检测与伊马替尼治疗GIST耐药
尽管伊马替尼在治疗GIST上取得了令人鼓舞的成绩，却不可避免的出现了耐药的问题。初步的研究表明耐药包括KIT依赖性或KIT非依赖性机制。多数病例的耐药可能还是源于KIT的再活化。这其中部分病例是因为获得了存在于或者接近药物－蛋白相互作用位点的突变或是能导致蛋白构象发生改变而使KIT与伊马替尼亲和力降低的突变，削弱了药物的效能。最近Chen LL等人报道了5例具有对伊马替尼敏感的外显子9或11突变的GIST病人在用药过程中发生了耐药，获得一种新的点突变-V654V，位于kit酪氨酸激酶结构域[7]。这一耐药很可能是由于KIT蛋白构象改变所致。
有意思的是最近Debiec-Rychter报道了一个新机制：一例病人由kit-G565R突变通过PDGFRA次级突变D842V而对伊马替尼产生耐药[8]。这一现象表明对伊马替尼耐药可以通过另一个激酶的突变（如PDGFRA）而实现。部分病例对伊马替尼的不敏感可能与c-kit或PDGFRA基因扩增有关。因此对于GIST病人不主张使用传统化疗，可能会促进与疾病演进相关的克隆分化进展，产生影响药物反应的基因改变。KIT非依赖性机制耐药的提出是基于发现有病例彻底失去了KIT的表达。通过间期FISH证实标记的kit/PDGFRA基因在等位基因上丢失。同时他们还通过实验发现对伊马替尼耐药的几种突变对PKC412，另一种KIT和PDGFR的抑制剂， 反应敏感。这为寻找伊马替尼耐药的替代品提供了有意义的线索。部分病例发生耐药的原因还不得而知，还有很多问题需要进一步研究。
综上，深入研究GIST发生、发展及治疗有效、耐药的分子机制可以为生物靶向治疗提供依据和新的靶点。
二、 Herceptin治疗乳腺癌与HER2/ neu (cerbB2 )基因过表达的检测
1．Herceptin治疗乳腺癌的分子基础
HER2/ neu 是EGFR（表皮生长因子受体）家族的一员，此家族在细胞信号转导中发挥重要作用，是细胞生长、分化及存活的重要调节者。通常情况下，HER2/ neu 只在胎儿期表达。到成年后，只在极少数组织内有低表达。而HER2/ neu正常基因产物的过度表达，已证实在卵巢癌、肺腺癌、原发性肾细胞癌等，尤其是乳腺癌的恶性转化上起了关键性的作用，并且是预后不良的指征。
由于HER2/ neu 的过表达与肿瘤发生密切相关,人们找到了一种抗HER2/ neu 的抗体来下调其表达,命名为Trastuzumab ( Herceptin) 。其通过直接和间接两种机制影响肿瘤生长：直接机制是抗体与HER2/ neu 结合改变了受体的信号传导功能。间接机制是抗体通过ADCC 和补体依赖的细胞毒作用杀伤肿瘤细胞，还可诱导细胞分化,诱导细胞凋亡。目前已成功应用于治疗HER2/ neu基因扩增或过度表达伴或不伴腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者。Herceptin无论单用还是联合化疗，无论作为一线还是二线选择，都是一个治疗乳腺癌转移的重要选择药物。由于其毒副反应小，患者耐受性好，已成为靶向性治疗的成功范例。
2．HER2/ neu基因过表达的检测方法
如何准确、方便地检测出HER2/ neu基因过表达的乳腺癌病例，为运用Herceptin 治疗提供依据以及判断预后，就成为病理工作者不断研究的课题。
目前最常用的方法有ELISA、FISH（原位杂交免疫荧光）及IHC（免疫组化）法。ELISA法主要用于检测乳腺癌患者血清或新鲜组织中的p185 总蛋白。此方法敏感、 简单、安全且费用低，但仅适用于新鲜标本，不适用石蜡包埋组织。FISH法用于检查分裂期细胞的核型、识别染色体数目、确定肿瘤细胞的来源。此方法特异性高且稳定、敏感，能直接观察HER2/ neu基因的扩增量。 缺点主要是价格较贵，难以普及。IHC法因操作简便，目前被广泛应用。但假阴性较高，且对阳性信号程度的判读上主观因素影响较大。我们正在试验用real-time PCR（实时监测聚合酶链反应）来检测HER2/ neu基因过表达。这项方法是分析mRNA扩增的水平，基于实时检测PCR 扩增的产物,不需要一般的PCR 的产物处理,因而避免了因为操作所产生的各种问题[9]。能够动态监测整个PCR 过程,具有定量性和实用性。需要特别强调的是只有对上述检测方法进行统一规范化，才能提供准确的HER2/ neu基因状态，为治疗提供可靠的依据。
3. 其他
除了上述两种成功应用的药物外，还有许多分子靶向药物也显示出很好的应用前景。如部分肺癌病例，对EGFR抑制剂治疗有效，与其EGFR激酶结构域的突变有关。 近来抑制肿瘤介导的血管生成为肿瘤治疗提供了非细胞毒性的新途径。A vastin(Bevacizum ab, rhuMAb－VEGF) 是第一个人重组的抗VEGF 单抗, 能够结合并阻断VEGF (血管内皮生长因子) 的作用, 从而发挥抗肿瘤活性。其疗效除了与间质血管形成模式有关外，还与肿瘤表达VEGF的水平相关[10]。
可以预想，在今后对于肿瘤分子靶向治疗的研究和运用中，分子病理学必将起到更大的作用，同时，也促进其与临床紧密结合，向更具实用性发展。
E. 病理学研究最常用的方法
是尸体剖检。
对死亡者的遗体进行病理剖检（尸检）是病理学的基本研究方法之一。尸体剖检（autopsy）不仅可以直接观察疾病的病理改变，从而明确对疾病的诊断，查明死亡原因，帮助临床探讨、验证诊断和治疗是否正确、恰当，以总结经验，提高临床工作的质量。
而且还能及时发现和确诊某些传染病、地方病、流行病、为防治措施提供依据，同时还可通过大量尸检积累常见病、多发病、以及其他疾病的人体病理材料，为研究这些疾病的病理和防治措施，为发展病理学作贡献。
显然，尸检是研究疾病的极其重要的方法和手段，人体病理材料则是研究疾病的最为宝贵的材料。
(5)病理学的运用扩展阅读：
病理学与临床医学之间的密切联系，明显地在对疾病的研究和诊断上。临床医学除运用各种临床诊察、检验、治疗等方法对疾病进行诊治外，往往还必须借助于病理学的研究方法如活体组织检查、尸体剖检以及动物实验等来对疾病进行观察研究，提高临床工作的水平。
病理学则除进行实验研究（实验病理学）外，也必须密切联系临床，直接从患病机体去研究疾病，否则也不利于病理学本身的发展。
病理学长期以来被形象地喻为“桥梁学科”，这充分表明了它在医学中，特别是在临床医学中占有不可替代的重要地位。其理由主要是由病理学的性质和任务所决定的。
F. 试述病理学的研究方法及在临床医学中的应用。
尸体解剖，免疫组织判断，活体组织检查，动物实验,临床诊断，细胞和组织的培养,治疗预防细胞学检查
G. 病理学课程在预防医学专业中的作用和意义什么呢
中公医疗卫生人才网为考生提供医学伦理学相关知识：预防医学含义及特点。
预防医学含义
预防医学是卫生事业的重要组成部分。它与临床医学、基础医学和康复医学组成现代医学科学的四大支柱。预防医学是以人群为主要研究对象，以环境-人群-健康为模式，以预防为主的观念为主导思想，运用生物医学、环境医学和社会医学等理论和方法，探讨疾病在人群中发生、发展和转归的特点，以及自然因素和社会因素对人群疾病和健康的影响规律，从而制定群体防治策略和公共卫生措施，并在实践中不断完善，以达到预防疾病、促进健康和提高生活质量为目的的学科。
预防医学的特点
1.价值导向的超前性;
2.服务对象和研究对象的整体性;
3.研究方法的独特性;
4.工作范围的全球性和广泛性;
5.工作效率的紧迫性和时效性;
6.工作过程的长期性和艰巨性;
7.工作效果评价的滞后性和效益影响的深远性。
更多精彩内容，请访问医疗卫生人才网!
H. 分子病理学临床应用主要有哪几个方面
从分子水平阐述基因组、基因、基因转录及其调控，细胞周期和信号转录等分子医学基础；主要疾病的病理变化分子机制及其关键性研究技术；迅速发展的基因诊断、基因治疗和基因工程蛋白质工程新药的研究。
分子病理学与人体解剖病理学及临床病理学、分子生物学、生物化学、蛋白质组学和遗传学，以及有时被视为“交叉”学科等有一定共同点。其本质及主要侧重于疾病的亚微观表现决定了它的多学科性质。
分子病理学包括运用分子和遗传学方法对肿瘤进行诊断和分类，设计和验证对治疗反应和病情发展的预测性生物标记物，不同的基因构成造成的对肿瘤的个人易感性，还有环境因素和生活方式对肿瘤发生的影响。
(8)病理学的运用扩展阅读
病理学在医学研究中的作用
现代病理学吸收了当今分子生物学的最新研究方法和取得的最新成果，使病理学的观察从器官、细胞水平，深入到亚细胞、蛋白表达及基因的改变。这不仅使病理学的研究更深入一步，同时也使病理学的研究方法渗透到各基础学科、临床医学、预防医学和药学等方面。
如某一基因的改变是否同时伴随蛋白表达及蛋白功能的异常，是否可以发生形态学改变；反之，某种形态上的异常是否出现某个（些）基因的异常或表达的改变。
临床医学中一些症状、体征的解释、新病种的发现和预防以及敏感药物的筛选、新药物的研制和毒副作用等都离不开病理学方面的鉴定和解释。因此，病理学在医学科学研究中也占有重要的地位。
I. 《病理学基础》是运用各种方法研究认识疾病的什么
一.对病理学课程的认识
疾病是一个极其复杂的过程。在病原因子和机体反应功能的相互作用下,患病机体有关部分的形态结构、代谢和功能都会发生种种改变,这是研究和认识疾病的重要依据。病理学的任务就是运用各种方法研究疾病的原因、在病因作用下疾病发生发展的过程,以及机体在疾病过程中的功能、代谢和形态结构的改变,阐明其本质,从而为认识和掌握疾病发生发展的规律,为防治疾病,提供必要的理论基础。
病理学是用自然科学的方法,研究疾病的病因、发病机制、形态结构、功能和代谢等方面的改变,揭示疾病的发生发展规律,从而阐明疾病本质的医学科学。病理学既是医学基础学科,同时又是一门实践性很强的具有临床性质的学科,称之为诊断病理学或外科病理学。按照研究对象的不同,还可分为人体病理学和实验病理学。病理学诊断常常是以诊断为目的,从病人或从病人体内获取的器官、组织、细胞或体液为对象,包括尸体剖检、外科病理学和细胞学。病理学的主要任务是研究和阐明:①病因学,即疾病发生的原因包括内因、外因及其相互关系;
②发病学,即在病因作用下导致疾病发生、发展的具体环节、机制和过程;③病理变化或病变,即在疾病发生发展过程中,机体的功能代谢和形态结构变化以及这些变化与临床表现之间的关系——临床病理联系;④疾病的转归和结局等。病理学为掌握疾病的本质,疾病的诊断、治疗和预防奠定科学的理论基础。而诊断病理学的主要任务是研究人类各种疾病的病变特点,从而做出疾病的病理学诊断和鉴别诊断,直接为临床防治疾病服务。
二.病理学的重要性
病理学长期以来被形象地喻为“桥梁学科”和“权威诊断”,这充分表明了它在医学中,特别是在临床医学中占有不可替代的重要地位。
J. 如何运用病理学知识做自我介绍
从校园到职场，我们的一生当中会不断结识陌生人、接触新的圈子，而与人打交道的第一步往往就是自我介绍。做自我介绍这件事显然非常重要，却让许多人发怵，一到介绍自己时就支支吾吾，除了“叫啥、多大、来自哪”以外再也憋不出几句话。
那么，究竟怎样才能做出一个漂亮的自我介绍，帮助让我们在面试、交友等场合建立起良好的第一印象？不妨尝试一下在除夕夜由得到App联合深圳卫视、爱奇艺共同举办并直播的2020「知识春晚」上，得到大学演讲教练马徐骏分享的一个自我介绍“万能公式”。
这个公式就是：“我是谁+跟你有什么关系+对你有什么用”。只要掌握这个公式，任何人都能够做出一个漂亮的自我介绍。
马徐骏以自己为例，向全国观众做了一段自我介绍：“你好，我是马徐骏，一名专业演讲教练。今天演讲的很多嘉宾，都是我训练的。我可以在一周之内让一个完全没有演讲经验的普通人，登上面对几千人的舞台，做一场燃爆全场的演讲。如果你想在人群中脱颖而出，可以来找我，我一定能通过演讲帮到你。”
据他分析，这段自我介绍只有短短的30秒，却包含了万能公式中三个要素——
第一个要素是“我是谁”。“我是谁”不等同于我叫什么，而是我有什么关键特征。在上面这段自我介绍中，“演讲”这个词出现了4次。其实这是利用了“听觉锤”的技巧，就是把关键信息通过听觉的方式，反反复复“锤”进对方的脑子里。
第二个要素：“我跟你有什么关系”。重点是找到一个你自己与受众的关联点，这样的话，听的人会对你多一份亲近，也会对你多一份接纳。比如马徐骏的这段自我介绍当中，就找到了一个与现场观众的关联点：“今天演讲的很多嘉宾，都是我训练的”。
第三个要素为“我对你有什么用”。马徐骏强调：你得能为对方提供价值，别人才能记得住你。就像他在自我介绍中说的：“假如你想在人群中脱颖而出，可以来找我，我一定能通过演讲帮到你。”这就是在强调自己对对方有什么价值。
“做个漂亮的自我介绍，不需要什么华丽的辞藻，只需要发自内心的，和对方连接，为对方服务，就够了。”马徐骏表示，“只有那些为世界提供价值的人，才能被世界记住。”
从马徐骏的分享，可以看出这台「知识春晚」的与众不同。没有明星大腕，没有娱乐表演，也没有华丽的舞台效果，「知识春晚」专注于分享知识，邀请到了55位各领域行家里手，以简单朴素的演讲方式为大众答疑解难、提供有趣有料又有用的“美好生活解决方案”。这其中，有医生分享“怎样正确做体检”，科普作家支招“如何让家人远离谣言”，心理学家解析“过年回家父母催婚怎么办”，宠物训练师科普“如何正确遛狗”等。当聚光灯照到这群奋斗在各行各业一线的普通人身上，他们所展现出的实干精神与鲜活智慧，给见惯了娱乐晚会的观众带来了惊喜和收获。
“涨姿势”，是广大观众对这台晚会的普遍反映。例如一位爱奇艺网友就评论称：“知识春晚不但传递知识，也传递了一种理念：知识就是力量。”还有微博网友表示：“看完知识春晚最大的感受是，这是一个办法真的比困难多的时代！”
免责声明：市场有风险，选择需谨慎！此文仅供参考，不作买卖依据。