Ⅰ 什麼是分子印跡技術
第八章 分子印跡技術
將各種生物大分子從凝膠轉移到一種固定基質上的過程稱為印跡技術(blotting)。
Southern在1975年首先提出了分子印漬的概念。他將瓊脂糖凝膠電泳分離的 DNA片段在凝膠中進行變性使其成為單鏈,然後將一張硝酸纖維素(nitrocellulose, NC)膜放在凝膠上,上面放上吸水紙巾,利用毛細管作用原理使凝膠中的DNA片段轉移到 NC膜上,使之成為固相化分子。載有DNA單鏈分子的 NC膜就可以在雜交液與另一種帶有標記的 DNA或RNA分子(即探針)進行雜交,具有互補序列的RNA或DNA結合到存在於 NC膜的 DNA分子上,經放射自顯影或其他檢測技術就可以顯現出雜交分子的區帶。由於這種技術類似於用吸墨紙吸收紙張上的墨跡,因此稱為「blotting」,譯為印跡技術。
生物大分子印跡技術發展極為迅速,己廣泛用於 DNA、RNA、蛋白質的檢測。通常人們將DNA印跡技術稱為Southern blotting,將RNA印跡技術稱為Northern blotting,將蛋白質印跡技術稱為Western blotting,將不經凝膠的印跡技術稱為斑點印跡(Dot blotting)。